EXAMEN DE GENETIQUE

DUREE: 2 Heures

PROBLEME I

On dispose d'un fragment d'ADN double brin de taille 14kb.

I. Afin de déterminer sa carte de restriction, on a procédé à sa simple digestion par PvuI, par Bam HI,

par Eco RI et à sa double digestion par Pvu l/Eco RI et par Barn HUEco RI. Les résultats obtenus sont

représentés dans le tableau suivant:

Représenter la carte de restriction de ce fragment d'ADN en Indiquant clairement le raisonnement

2. Le fragment de taille 9 kb issu de la digestion par Pvu I a été cloné en utilisant le vecteur plasmidique

bactérien pBR322 dont la taille est de 4360pb.

Après avoir fait toutes les étapes du clonage, proposer un protocole permettant de sélectionner les

bactéries transformées par un vecteur recombinant.

3. Un premier clone bactérien sélectionné a été utilisé pour extraire l'ADN du plasmide recombinant. Celui-ci

fait l'objet d'une digestion par Bam HI. Les résultats obtenus révèlent des fragments de taille 4.3, 4.2, et

4.86kb. Interpréter ces résultats et représenter le plus fidèlement le plasmide recombinant avec

l'emplacement des sites de restriction par les différentes enzymes.

4. Un deuxième clone recombinant a été utilisé. La digestion du plasmide recombinant de ce clone par

BamHI a donné des fragments de tailles différentes par rapport au plasmide du premier clone. Expliquer ce

résultat.

PROBLEME II

Chez une espèce végétale deux plantes résistantes 1 et 2 à un herbicide ont été sélectionnées. Une étude

préalable a montré que les protéines de ces plantes diffèrent de celles des plantes sauvages (sensibles) par

une protéine particulière P. La séquence du gène correspondant -à la protéine été déterminée chez les

deux plantes résistantes 1 et 2 et chez la plante sauvage sensible. Les séquences représentées correspondent

au brin non transcrit codant pour une région interne de la protéine P de taille 10 acides aminés.

Sensible : 5 ' . . . A T G T A G C C A G A G T G A A C A C G G A G A C A G T C A . . . . . 3 ’

Plante 1 : 5 ' . . . A T G T A G C C A G A G T G A A C A C G G A G A C A G T C A . . . . . 3'

Plante 2 : 5 ' . . . A T G T A G C C A G A G A G T G A A C A C G G A G A G T C A . . . . . 3'

a/ Déterminer les séquences correspondantes en acides aminés chez la plante sauvage.

b/ Quel type d'événement a été à l'origine du phénotype résistant à l'herbicide de chacune des deux

plantes ?